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                      嘔吐毒素ELISA試劑盒檢測原理及注意事項?

                      更新時間:2023-11-10      點擊次數:117
                        嘔吐毒素ELISA試劑盒檢測原理及注意事項?
                       
                        原理
                       
                        測定的基礎是抗原-抗體反應。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素(DON)標準品或樣品、酶標抗原和抗體后,游離的嘔吐毒素與酶標抗原競爭結合抗體,抗體或抗體結合物與固定在微孔板上的抗抗體再結合,沒有結合的標準品、酶標抗原及抗體被洗去,加入TMB底物顯藍色,加入終止液后顏色由藍變黃,用酶標儀在450nm處檢測,吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負相關,與標準曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。
                       
                        注意事項
                       
                        1)室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會導致數值偏低。
                       
                        2)在洗板過程中如果出現板孔干燥過久的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。
                       
                        3)標準物質和顯色液對光敏感,避免直接暴露在光線下。
                       
                        4)混合要均勻,洗板要干凈(包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻)。
                       
                        5)終止液為強酸性物質,避免接觸皮膚。
                       
                        6)不要使用過了有效期的試劑盒,也不要混合使用不同批次的試劑盒,這樣會引起測定結果不準確。
                       
                        7)試劑盒的儲存條件是2-8℃,切勿冷凍。
                       
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